01

小鼠條件性恐懼模型的建立

小鼠購(gòu)入后適應(yīng)性飼養(yǎng)6d，實(shí)驗(yàn)當(dāng)天提前1h放入實(shí)驗(yàn)間。不同品系小鼠放入電擊箱內(nèi)（A環(huán)境） 自由探索 2min（適應(yīng)期）后，給與30s聲音刺激 （85dB，5000Hz），后2 s伴隨給與不可逃避的足底 電擊（0.6mA，持續(xù)2s），聲音-電擊共配對(duì)5次，每 次間隔2min。計(jì)算機(jī)軟件記錄各個(gè)階段（包括適應(yīng)期、5輪聲音刺激期和5輪間歇期）的僵住時(shí)間，僵住 時(shí)間百分率（%）=僵住時(shí)間（s）/總時(shí)間（s）×100%。 僵住行為是嚙齒類(lèi)動(dòng)物表達(dá)恐懼的方式，表現(xiàn)為除 呼吸運(yùn)動(dòng)外全身其余的肌肉運(yùn)動(dòng)均消失。

02

場(chǎng)景恐懼和聲音線(xiàn)索恐懼表達(dá)的檢測(cè)

場(chǎng)景恐懼表達(dá)檢測(cè)：條件性恐懼訓(xùn)練24h后， 將小鼠再次置于接受過(guò)電擊的裝置（環(huán)境A：足底電 柵欄+白光）中，不給與任何刺激，進(jìn)行環(huán)境重現(xiàn)，使用VisuTrack軟件（上海欣軟）記錄5min內(nèi)的僵住時(shí)間（Freezing時(shí)間），計(jì)算僵住時(shí)間百分率，評(píng)價(jià)小鼠場(chǎng)景條件恐懼表達(dá)的特點(diǎn)。

聲音線(xiàn)索恐懼表達(dá)檢測(cè)：場(chǎng)景恐懼檢測(cè)2h后， 將小鼠置于新環(huán)境（環(huán)境B：三角形半透明黑色套 盒+白色底板+無(wú)白光）中，2min適應(yīng)期后進(jìn)行30s聲音刺激，聲音刺激結(jié)束30s后將動(dòng)物取出，記錄各個(gè)階段（包括適應(yīng)期、聲音刺激期和間歇期）的僵住時(shí)間，計(jì)算僵住時(shí)間百分率，用于評(píng)價(jià)3種品系小鼠線(xiàn)索條件恐懼表達(dá)的特點(diǎn)。

03

條件性恐懼的自然消退

以C57小鼠為研究對(duì)象，分別于條件性恐懼訓(xùn)練后第2，7，14，21和28天對(duì)其場(chǎng)景恐懼和聲音線(xiàn)索恐懼進(jìn)行檢測(cè)，以評(píng)價(jià)該品系小鼠條件性恐懼的自然消退特點(diǎn)。其中，場(chǎng)景恐懼檢測(cè)5min內(nèi)僵住 時(shí)間（環(huán)境A，無(wú)聲音信號(hào)，不電擊），聲音線(xiàn)索恐懼檢測(cè) 30s聲音刺激期內(nèi)僵住時(shí)間（環(huán)境B，不電擊， 2min適應(yīng)+30s聲音信號(hào)+30s間歇），計(jì)算僵住時(shí)間百分率。

04

聲音線(xiàn)索恐懼消退訓(xùn)練和消退保持測(cè)試

以 C57小鼠為研究對(duì)象，在條件性恐懼訓(xùn)練（方法見(jiàn)第一段）后24h進(jìn)行聲音線(xiàn)索恐懼消退訓(xùn)練， 消退訓(xùn)練結(jié)束后24h進(jìn)行消退保持測(cè)試。

消退訓(xùn)練方法：將C57小鼠放入B環(huán)境電擊箱中，適應(yīng) 2min后，采用“30s聲音刺激+30s間歇期"方法給 與10次聲音刺激，計(jì)算機(jī)軟件記錄適應(yīng)期、10輪聲 音刺激階段和10輪間歇期的僵住時(shí)間，計(jì)算僵住時(shí) 間百分率，作為消退訓(xùn)練成績(jī)。

消退保持測(cè)試方法：將 C57小鼠放入B 環(huán)境電擊箱中，適應(yīng)2min 后，給與30s聲音刺激1次，刺激結(jié)束30s后將動(dòng) 物取出，記錄不同階段（適應(yīng)期+30s聲音刺激期+ 30s間歇期）內(nèi)僵住時(shí)間并計(jì)算僵住時(shí)間百分率， 作為消退保持成績(jī)。

05

文章引用（節(jié)選）

中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志2020年2月第34卷第2期，薛瑞，魏肇余，張森品，陳紅霞，李云峰，張有志，《小鼠條件性恐懼模型的建立和品系敏感性研究》